2',3',5'-Tri-O-acetyluridine ถูกนำมาใช้อย่างแพร่หลายในกระบวนการสังเคราะห์ทางเคมี โดยเฉพาะในขั้นตอนการเตรียมสารตั้งต้นสำหรับการผลิตยาและสารชีวโมเลกุล เนื่องจากโครงสร้างของมันช่วยอำนวยความสะดวกในการปรับเปลี่ยนทางเคมีต่อไปได้ง่าย มักใช้ในการสังเคราะห์นิวคลีโอไซด์และนิวคลีโอไทด์ ซึ่งเป็นส่วนสำคัญในการพัฒนายาต้านไวรัสและยาต้านมะเร็ง นอกจากนี้ยังใช้ในงานวิจัยทางชีวเคมีเพื่อศึกษากลไกการทำงานของเอนไซม์และกระบวนการทางชีววิทยาที่เกี่ยวข้องกับ RNA