PF-5274857 ถูกใช้หลักๆ ในงานวิจัย โดยเฉพาะในสาขามะเร็งวิทยา โดยทำหน้าที่เป็นตัวยับยั้งเฉพาะเจาะจงของเส้นทางสัญญาณ Hedgehog ซึ่งมีบทบาทสำคัญในการเพิ่มจำนวนเซลล์และการแยกตัวของเซลล์ การกำหนดเป้าหมายเส้นทางนี้ช่วยในการศึกษากลไกของมะเร็งต่างๆ โดยเฉพาะมะเร็งที่ขับเคลื่อนโดยสัญญาณ Hedgehog ที่ผิดปกติ เช่น มะเร็งเซลล์ฐาน (basal cell carcinoma) และมะเร็งเมดูลโลบลาสโตมา (medulloblastoma) นักวิจัยใช้สารนี้เพื่อสำรวจกลยุทธ์การรักษาที่เป็นไปได้และเพื่อเข้าใจพื้นฐานโมเลกุลของการเจริญเติบโตและการลุกลามของเนื้องอก นอกจากนี้ยังเป็นเครื่องมือที่มีคุณค่าในการศึกษาก่อนคลินิกเพื่อประเมินประสิทธิภาพของการรักษามะเร็งใหม่