ใช้เป็นสารตั้งต้นในการสังเคราะห์ยารักษาโรคมะเร็ง โดยเฉพาะยาที่ออกฤทธิ์ยับยั้งเอนไซม์โฟเลตเดไฮโดรจีเนส (dihydrofolate reductase: DHFR) ซึ่งมีบทบาทสำคัญในกระบวนการสังเคราะห์กรดนิวคลีอิกของเซลล์ที่แบ่งตัวเร็ว เช่น เซลล์มะเร็ง สารนี้จึงถูกนำไปพัฒนาต่อเป็นยาแอนตี้โฟเลต (antifolate) ที่ช่วยยับยั้งการเติบโตของเซลล์มะเร็ง โดยเฉพาะในมะเร็งเม็ดเลือดขาว มะเร็งเต้านม และมะเร็งบางชนิดที่ตอบสนองต่อการรักษาด้วยยาที่ทำงานเกี่ยวข้องกับระบบเมแทบอลิซึมของโฟเลต นอกจากนี้ยังถูกศึกษาเพื่อใช้ในยารักษาโรคอักเสบเรื้อรังและโรคภูมิคุ้มกันบกพร่องบางชนิดเนื่องจากมีผลต่อการควบคุมการแบ่งตัวของเซลล์เม็ดเลือดและเซลล์ภูมิคุ้มกัน