ใช้อย่างแพร่หลายเป็นสารตั้งต้นโครโมเจนิกในการทดสอบเอนไซม์ โดยเฉพาะสำหรับตรวจจับและวัดปริมาณกิจกรรมของ β-N-acetylglucosaminidase ซึ่งเป็นเอนไซม์ที่เกี่ยวข้องกับการย่อยสลายไกลโคโปรตีนและไกลโคซามิโนไกลแคนในระบบชีวภาพ สารนี้เมื่อถูกย่อยโดยเอนไซม์จะปลดปล่อย 2-chloro-4-nitrophenol ซึ่งเป็นผลิตภัณฑ์สีเหลืองชัดเจนและสามารถวัดความเข้มของสีได้ที่ความยาวคลื่นประมาณ 400–410 นาโนเมตร ทำให้เหมาะสำหรับการวิเคราะห์เชิงปริมาณแบบสเปกโตรโฟโตเมตริก นิยมใช้ในงานวินิจฉัยทางคลินิก จุลชีววิทยา และการวิจัยทางชีวเคมี เพื่อประเมินกิจกรรมเอนไซม์ในตัวอย่างชีวภาพ เช่น ปัสสาวะ ซีรัม และไลเซตของเซลล์ ความจำเพาะและความไวสูงทำให้เหมาะสำหรับระบบทดสอบทั้งแบบแมนนวลและอัตโนมัติ นอกจากนี้ยังใช้ในการศึกษาที่เกี่ยวข้องกับโรคสะสมในไลโซโซมและการระบุจุลินทรีย์