HEPES Buffer ถูกใช้อย่างแพร่หลายในงานวิจัยทางชีววิทยาและชีวเคมี เนื่องจากมีความสามารถในการรักษาค่า pH ให้คงที่ในช่วง 6.8 ถึง 8.2 ซึ่งเหมาะสมสำหรับการทดลองหลายประเภท เช่น การเพาะเลี้ยงเซลล์ การศึกษาเอนไซม์ และการทดสอบทางชีวโมเลกุล HEPES Buffer มักถูกเลือกใช้แทนบัฟเฟอร์อื่นๆ เนื่องจากไม่ทำปฏิกิริยากับโลหะ และมีเสถียรภาพสูงแม้อยู่ในสภาวะที่มีการเปลี่ยนแปลงของอุณหภูมิ นอกจากนี้ ยังใช้ในกระบวนการแยกและวิเคราะห์โปรตีน เพื่อป้องกันการเปลี่ยนแปลงของโครงสร้างและหน้าที่ของโปรตีนที่อาจเกิดขึ้นจากค่า pH ที่ไม่เหมาะสม