HEPES buffer ถูกนำมาใช้อย่างกว้างขวางในงานวิจัยทางชีววิทยาและชีวเคมี เนื่องจากมีความสามารถในการรักษาค่า pH ให้คงที่ในอาหารเพาะเลี้ยงเซลล์และปฏิกิริยาเอนไซม์ โดยมีประสิทธิภาพสูงในการรักษา pH ระหว่าง 6.8 ถึง 8.2 ทำให้เหมาะสำหรับเซลล์หลากหลายประเภท รวมถึงเซลล์จากสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนม พืช และแบคทีเรีย HEPES ถูกใช้บ่อยในงานศึกษากับโปรตีน เนื่องจากไม่รบกวนโครงสร้างหรือการทำงานของโปรตีน และยังใช้ในเทคนิค electrophoresis และ chromatography นอกจากนี้ ยังเป็นบัฟเฟอร์ที่เลือกใช้ในงานจุลทรรศนศาสตร์และการศึกษาความ fluorescens เพราะไม่แสดง autofluorescence ทำให้ได้ผลการถ่ายภาพที่แม่นยำ ความเป็นพิษต่ำและการโต้ตอบกับไอออนโลหะน้อย ทำให้เหมาะสำหรับการทดลองและ assays ที่ละเอียดอ่อน HEPES ยังใช้ในกระบวนการเพาะเลี้ยงเซลล์เพื่อให้เซลล์เจริญเติบโตอย่างมีประสิทธิภาพ และเป็นส่วนประกอบในสารละลายสำหรับการทดสอบทางชีวภาพต่างๆ เช่น PCR และการแยก DNA รวมถึงการศึกษาปฏิกิริยาเคมีในสภาวะใกล้เคียงกับร่างกายมนุษย์เพื่อผลลัพธ์ที่แม่นยำ