L-Asparagine มีบทบาทสำคัญในกระบวนการเมตาบอลิซึมของโปรตีน โดยเฉพาะในกระบวนการสังเคราะห์โปรตีนในร่างกาย ใช้ในอุตสาหกรรมอาหารเพื่อช่วยในการควบคุมการเกิดสีน้ำตาล (Maillard reaction) ทำให้อาหารมีสีและกลิ่นที่น่ารับประทาน เช่น ในการผลิตมันฝรั่งทอดกรอบหรือขนมปัง ในทางการแพทย์ L-Asparagine เป็นส่วนหนึ่งของการรักษาผู้ป่วยโรคเลือดชนิดหนึ่ง โดยเฉพาะโรคลูคีเมียชนิด acute lymphoblastic leukemia (ALL) เนื่องจากเซลล์มะเร็งชนิดนี้ไม่สามารถผลิต L-Asparagine ได้เอง จึงต้องพึ่งสารจากภายนอก การใช้ยาที่ยับยั้งการทำงานของ L-Asparagine จึงช่วยลดการเจริญเติบโตของเซลล์มะเร็งได้ นอกจากนี้ยังใช้ในผลิตภัณฑ์เสริมอาหารและเครื่องสำอาง เนื่องจากมีคุณสมบัติช่วยคงความชุ่มชื้นให้ผิว และลดอาการอ่อนล้าของร่างกาย