2-Ethynyl-4-nitropyridine ถูกใช้หลักๆ ในกระบวนการสังเคราะห์อินทรีย์ โดยทำหน้าที่เป็นสารกลางสำคัญในการพัฒนายาและสารเคมีเกษตร โครงสร้างของมันที่มีทั้งกลุ่มเอทินิลและกลุ่มไนโตร ทำให้มีคุณค่าต่อการสร้างโมเลกุลที่ซับซ้อนผ่านปฏิกิริยาเช่น การจับคู่ Sonogashira และการแทนที่นิวคลีโอฟิลิก สารนี้มีประโยชน์โดยเฉพาะในการสังเคราะห์สารประกอบเฮเตโรไซคลิก ซึ่งมักพบในยาที่เล็งเป้าไปยังโรคต่างๆ นอกจากนี้ กลุ่มไนโตรสามารถถูกย่อให้เป็นกลุ่มอะมีน ทำให้สามารถทำการปรับแต่งเพิ่มเติมเพื่อสร้างโมเลกุลชีวภาพ ในงานวิจัย สารนี้ถูกนำมาใช้เพื่อศึกษากลไกปฏิกิริยาและพัฒนาวิธีการสังเคราะห์ใหม่ๆ