5-Acetylnicotinonitrile ใช้หลักในการสังเคราะห์ยา โดยทำหน้าที่เป็นสารตั้งต้นสำคัญในการผลิตยาหลากหลายชนิด โดยเฉพาะยาที่มุ่งเป้าไปยังความผิดปกติของระบบประสาทส่วนกลาง กลุ่มนิทไรล์และอะซิติลของมันทำให้เป็นส่วนประกอบที่หลากหลายในการสร้างโมเลกุลที่ซับซ้อนในเคมียารักษาโรค นอกจากนี้ ยังใช้ในการพัฒนาสารเคมีเกษตร สนับสนุนการสร้างยาฆ่าแมลงและสารกำจัดวัชพืช ในงานวิจัย ใช้ในการศึกษาการยับยั้งเอนไซม์ และเป็นสารตั้งต้นในการสังเคราะห์อินทรีย์เพื่อพัฒนาสารประกอบใหม่ที่มีคุณสมบัติบำบัดที่อาจมีประโยชน์