สารประกอบนี้ใช้หลักในการวิจัยทางชีวเคมีเป็นสารตั้งต้นสำหรับเอนไซม์โปรตีเอสต่างๆ โดยเฉพาะเอนไซม์ที่เกี่ยวข้องกับการแข็งตัวของเลือดและการย่อยสลายฟิบริน มักใช้ในแอสเซย์เพื่อวัดกิจกรรมของเอนไซม์ เช่น thrombin, plasmin และ trypsin การตัดพันธะเปปไทด์โดยเอนไซม์เหล่านี้จะปล่อย 4-nitroaniline ซึ่งสามารถตรวจวัดได้ด้วยสเปกโตรโฟโตเมตรีที่ 405 nm ช่วยให้วิเคราะห์ปริมาณกิจกรรมเอนไซม์ได้ ความจำเพาะและความไวของสารนี้ทำให้เป็นเครื่องมือที่มีค่าการศึกษากิเนติกส์เอนไซม์ การคัดกรองตัวยับยั้ง และการเข้าใจกลไกการย่อยโปรตีนในระบบชีวภาพ นอกจากนี้ ยังใช้ในการวินิจฉัยทางคลินิกเพื่อประเมินความผิดปกติของการแข็งตัวของเลือดและติดตามการรักษาทางการแพทย์