ใช้เป็นซับสเตรตในการศึกษาและวัดกิจกรรมของเอนไซม์ทริปซิน (trypsin) และเอนไซม์โปรตีเอสชนิดอื่นที่จำเพาะต่อการตัดพันธะเปปไทด์หลังกรดอะมิโนอาร์จินีน (Arginine) โดยเมื่อเอนไซม์ตัดพันธะเปปไทด์ จะทำให้ปลดปล่อยกลุ่ม p-nitroaniline ออกมา ซึ่งสามารถตรวจวัดการดูดกลืนแสงที่ความยาวคลื่น 405-410 นาโนเมตรได้ ช่วยให้ประเมินอัตราการเร่งของปฏิกิริยาได้อย่างแม่นยำ เหมาะสำหรับใช้ในงานวิจัยด้านชีวเคมี การคัดกรองสารยับยั้งเอนไซม์ และการควบคุมคุณภาพของเอนไซม์ในห้องปฏิบัติการ