ใช้ในห้องปฏิบัติการวิจัยเพื่อศึกษาการทำงานของเอนไซม์โปรตีเอส โดยเฉพาะเอนไซม์ที่แยกเปปไทด์ที่มีลำดับเฉพาะ เช่น ทริปซินหรือคิโมทริปซิน เนื่องจากหมู่พีเอ็นเอ (p-nitroanilide) ทำหน้าที่เป็นสารตั้งต้นที่ให้สีเมื่อถูกตัดด้วยเอนไซม์ จึงสามารถติดตามอัตราการเกิดปฏิกิริยาได้โดยการวัดค่าการดูดกลืนแสงที่ความยาวคลื่น 405 นาโนเมตร นิยมใช้ในระบบวิเคราะห์เชิงเอนไซม์เพื่อประเมินประสิทธิภาพของสารยับยั้งเอนไซม์หรือศึกษาคุณสมบัติของเอนไซม์ใหม่ๆ