ใช้เป็นสารตั้งต้นในการสังเคราะห์อนุพันธ์วิตามินบี12 โดย hydroxocobalamin acetate มีบทบาทในสูตรยาเภสัชกรรมสำหรับรักษาภาวะขาดวิตามินบี12 มีคุณค่าอย่างยิ่งในรูปแบบฉีดเนื่องจากความเสถียรและความสามารถในการแปลงเป็นรูปแบบโคเอนไซม์ที่ใช้งานได้ในร่างกาย นอกจากนี้ยังใช้ในการจัดการพิษจากไซยาไนด์ โดยทำหน้าที่จับกับไซยาไนด์เพื่อสร้าง cyanocobalamin ซึ่งขับออกทางปัสสาวะ การประยุกต์ใช้ยังรวมถึงการวินิจฉัยโรคเมแทบอลิซึมที่เกี่ยวข้องกับ cobalamin เนื่องจากมีพิษต่ำและประสิทธิภาพสูง จึงเหมาะสำหรับผู้ป่วยกลุ่มเสี่ยง เช่น ผู้ที่มีปัญหาไต นิยมใช้ในกรณีผู้ป่วยสัมผัสหรือได้รับไซยาไนด์ในระดับอันตราย เช่น จากอุบัติเหตุไฟไหม้หรือการสัมผัสสารเคมีอุตสาหกรรม และใช้เสริมในผู้ที่มีภาวะขาดวิตามินบี12 หรือมีปัญหาการดูดซึมวิตามินบี12 ช่วยฟื้นฟูการทำงานของระบบประสาทและสร้างเม็ดเลือดแดง