3',3'',5',5''-Tetraiodophenolphthalein ใช้หลัก ๆ ในการวินิจฉัยทางการแพทย์ โดยทำหน้าที่เป็นสารคอนทราสต์ในภาพถ่ายรังสี ช่วยเพิ่มความชัดเจนของโครงสร้างภายในระหว่างการตรวจเอกซเรย์ โดยเฉพาะอย่างยิ่งในระบบทางเดินอาหาร ปริมาณไอโอดีนในสารนี้ทำให้มีประสิทธิภาพในการดูดซับรังสีเอกซ์ ส่งผลให้ได้ภาพที่ชัดเจนยิ่งขึ้นสำหรับการวินิจฉัยที่แม่นยำของภาวะต่าง ๆ เช่น การอุดตัน เนื้องอก หรือความผิดปกติ นอกจากนี้ ยังมีการนำไปใช้ในงานวิจัยเพื่อศึกษาการดูดซึมและการเผาผลาญไอโอดีนในระบบชีวภาพ การจัดการสารนี้ต้องทำอย่างเหมาะสมเนื่องจากมีความเป็นพิษที่อาจเกิดขึ้นและไวต่อแสง