EDTA disodium salt dihydrate ใช้กันอย่างแพร่หลายในทางการแพทย์ โดยทำหน้าที่เป็นสารจับเชเลตเพื่อรักษาอาการพิษจากโลหะหนัก โดยเฉพาะตะกั่ว โดยจับไอออนโลหะในกระแสเลือด ทำให้สามารถขับออกทางปัสสาวะได้

ในห้องปฏิบัติการ ใช้เพิ่มในบัฟเฟอร์และอาหารเพาะเลี้ยงเซลล์เพื่อควบคุมการปนเปื้อนของไอออนโลหะ ซึ่งอาจรบกวนปฏิกิริยาเอนไซม์ ความสามารถในการทำให้เอนไซม์ที่ขึ้นกับโลหะไม่ทำงานช่วยป้องกันการเสื่อมสภาพของตัวอย่างชีวภาพ นอกจากนี้ยังใช้เป็นสารยับยั้งการแข็งตัวของเลือดในหลอดเก็บตัวอย่างเลือด โดยการจับไอออนแคลเซียม

ในอุตสาหกรรมอาหาร ทำหน้าที่เป็นสารกันบูดโดยการกักเก็บไอออนโลหะที่เร่งปฏิกิริยาออกซิเดชัน ช่วยรักษาสี รสชาติ และอายุการเก็บรักษาของผลิตภัณฑ์ เช่น น้ำสลัด อาหารกระป๋อง และเครื่องดื่ม โดยเฉพาะการจับไอออนเหล็กและทองแดง

ในอุตสาหกรรมเครื่องสำอางและผลิตภัณฑ์ดูแลผิว ใช้เพื่อเพิ่มความคงตัวโดยป้องกันการเสื่อมสภาพจากโลหะที่กระตุ้น นอกจากนี้ยังช่วยเพิ่มประสิทธิภาพของสารต้านอนุมูลอิสระและรักษาความชัดเจนของผลิตภัณฑ์

ในงานอุตสาหกรรม ใช้ในน้ำยาล้างจานและสารทำความสะอาดเพื่อทำให้น้ำอ่อนลงโดยการจับไอออนแคลเซียมและแมกนีเซียม เพิ่มประสิทธิภาพการทำความสะอาด ยังใช้ในกระบวนการสิ่งทอและการผลิตกระดาษเพื่อป้องกันการเปลี่ยนสีและการเสื่อมสภาพจากโลหะ

นอกจากนี้ ยังใช้ในเกษตรกรรมเป็นสารจับเชเลตในปุ๋ยน้ำเพื่อช่วยให้พืชดูดซึมธาตุอาหารจุลธาตุได้ดีขึ้น โดยเฉพาะในดินที่มีค่า pH สูง