4-Nitrophenyl α-D-galacto-pyranoside ใช้เป็นสารตั้งต้นในกระบวนการวิเคราะห์ทางชีวเคมี โดยเฉพาะในการทดสอบกิจกรรมของเอนไซม์ α-galactosidase ซึ่งเอนไซม์นี้มีความสำคัญในการศึกษาปัญหาทางพันธุกรรม เช่น โรค Fabry การทดสอบมักวัดปริมาณของ 4-nitrophenol ที่ถูกปล่อยออกมาเมื่อเอนไซม์ทำปฏิกิริยากับสารนี้ ซึ่งสามารถวัดได้ด้วยเครื่อง spectrophotometer ที่ความยาวคลื่น 405 nm นอกจากนี้ ยังใช้ในงานวิจัยด้านชีววิทยาโมเลกุลเพื่อศึกษากลไกการทำงานของเอนไซม์และพัฒนาวิธีการรักษาโรคที่เกี่ยวข้องกับการขาดเอนไซม์นี้