o-Phenylenediamine (OPD) ใช้อย่างแพร่หลายเป็นรีเอเจนต์ในงานทดสอบทางชีวเคมี โดยเฉพาะใน ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay) ซึ่งทำหน้าที่เป็นสารตั้งต้นให้สี เมื่อถูกออกซิไดซ์โดยฮอร์สแรดิชเพอร์ออกซิเดส (HRP) OPD จะผลิตผลิตภัณฑ์สีที่ช่วยในการตรวจจับและวัดปริมาณโปรตีนหรือแอนติบอดีเป้าหมาย

ในอุตสาหกรรมสีย้อม OPD เป็นสารตั้งต้นสำคัญในการสังเคราะห์สีย้อมและเม็ดสีต่างๆ รวมถึงสีย้อมผม สีย้อมผ้า และสีย้อมขนสัตว์ ความสามารถในการสร้างโครงสร้างซับซ้อนทำให้มีคุณค่าในการสร้างสีที่สดใสและคงทน

นอกจากนี้ OPD ยังใช้ในการผลิตโพลิเมอร์ พลาสติก และยางสังเคราะห์ โดยทำหน้าที่เป็นโมโนเมอร์ สารเชื่อมขวาง หรือสารต้านอนุมูลอิสระ เพื่อเพิ่มคุณสมบัติของวัสดุ เช่น ความทนทาน ความคงตัวทางความร้อน และความยืดหยุ่น

ในอุตสาหกรรมเภสัชกรรม OPD ใช้เป็นสารตั้งต้นในการสังเคราะห์ยาบางชนิด เช่น ยาปฏิชีวนะและยาฆ่าเชื้อรา

ในการวิเคราะห์ทางเคมี OPD ใช้เป็นรีเอเจนต์สำหรับการตรวจวัดสารบางชนิด เช่น กลูโคสและไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์ และเป็นสารจับเชลาตสำหรับการตรวจจับไอออนโลหะ ช่วยในการระบุและวัดปริมาณโลหะเฉพาะในตัวอย่าง

ในอุตสาหกรรมอิเล็กทรอนิกส์ ใช้ในการผลิตวัสดุเซมิคอนดักเตอร์และสารเคลือบป้องกัน

อย่างไรก็ตาม เนื่องจากมีศักยภาพในการเป็นพิษ เป็นสารก่อมะเร็ง และก่อให้เกิดอาการแพ้ การจัดการ OPD ต้องใช้มาตรการความปลอดภัยที่เข้มงวดเพื่อลดความเสี่ยงต่อสุขภาพ