DiFMUP ถูกใช้อย่างแพร่หลายเป็นสารตั้งต้นเรืองแสงในงานทดสอบกิจกรรมเอนไซม์ โดยเฉพาะสำหรับตรวจจับเอนไซม์ฟอสฟาเทส เช่น อัลคาไลน์ฟอสฟาเทส เมื่อเอนไซม์ตัด DiFMUP จะผลิตผลิตภัณฑ์ที่เรืองแสงสูงซึ่งสามารถวัดได้ง่ายโดยใช้เครื่องอ่านความเรืองแสง ทำให้เหมาะสำหรับการคัดกรองแบบ high-throughput ในงานค้นคว้ายา การทดสอบวินิจฉัย และการถ่ายภาพเซลล์ ความเรืองแสงพื้นหลังต่ำและความไวสูงช่วยให้ตรวจจับกิจกรรมเอนไซม์ได้อย่างแม่นยำแม้ในความเข้มข้นต่ำ นอกจากนี้ยังใช้ในงานศึกษาทาง kinase pathways ซึ่งกิจกรรมฟอสฟาเทสต้องถูกตรวจสอบเป็นส่วนหนึ่งของการวิเคราะห์ signal transduction