4β-Hydroxycholesterol ถูกใช้เป็นตัวบ่งชี้ชีวภาพ (biomarker) ในการประเมินกิจกรรมของเอนไซม์ CYP3A4 ซึ่งเป็นเอนไซม์สำคัญในตับที่เกี่ยวข้องกับการเผาผลาญยาหลายชนิด โดยระดับของ 4β-Hydroxycholesterol ในพลาสมาสามารถสะท้อนการเหนี่ยวนำ (induction) หรือยับยั้ง (inhibition) ของเอนไซม์นี้ได้ ทำให้มีประโยชน์ในการศึกษาปฏิกิริยาระหว่างยากับยา (drug-drug interactions) โดยเฉพาะในงานวิจัยทางคลินิกที่ต้องการประเมินผลกระทบของยาใหม่ต่อระบบการเผาผลาญในร่างกาย นอกจากนี้ยังช่วยในการปรับขนาดยาให้เหมาะสม และลดความเสี่ยงจากผลข้างเคียงที่อาจเกิดขึ้นจากการใช้ยาหลายชนิดร่วมกัน