4-Nitrophenyl 4-guanidinobenzoate (NPGB) ทำหน้าที่เป็นสาร chromogenic สำหรับการ titrate ตำแหน่ง active-site และเป็น substrate สำหรับโปรตีเอสกลุ่มเซอรีน โดยเฉพาะทริปซินและเอนไซม์คล้ายทริปซิน สารนี้ทำปฏิกิริยากับเซอรีนในตำแหน่ง active-site สร้าง intermediate acyl-enzyme ที่เป็นพันธะโคเวเลนต์ และปล่อย 4-nitrophenol ซึ่งให้สีเหลืองที่ตรวจจับได้ที่ 405–410 nm การปล่อยสีแบบ burst อย่างรวดเร็วในช่วงแรกช่วยให้สามารถวัดปริมาณเอนไซม์ที่ active ได้อย่างแม่นยำ ในขณะที่การ hydrolysis ช้าๆ ต่อเนื่องช่วยในการศึกษากinetcis และการยับยั้งของเอนไซม์ ด้วยความจำเพาะ ความเสถียร และความไว สารนี้ถูกนำมาใช้อย่างแพร่หลายในงานวิจัยชีวเคมี การตรวจวินิจฉัย และการคัดกรอง high-throughput สำหรับการพัฒนายาในเภสัชกรรมที่มุ่งเป้าไปยังกระบวนการที่เกี่ยวข้องกับโปรตีเอส เช่น การอักเสบ การแข็งตัวของเลือด และการแพร่กระจายของเซลล์มะเร็ง นอกจากนี้ยังทำหน้าที่เป็นตัวยับยั้งแบบ mechanism-based และโมเลกุลต้นแบบสำหรับการพัฒนายารักษาโปรตีเอสที่ผิดปกติ