o-Dianisidine dihydrochloride ใช้เป็นสารเคมีหลักในห้องปฏิบัติการเคมีสำหรับการตรวจจับและวัดปริมาณสารต่างๆ โดยเฉพาะในวิธีทดสอบสีเพื่อวัดการมีอยู่ของเพอร์ออกไซด์ โดยเฉพาะในตัวอย่างทางชีวภาพและสิ่งแวดล้อม สารนี้ทำปฏิกิริยากับเพอร์ออกไซด์เพื่อผลิตผลิตภัณฑ์ที่มีสี ซึ่งช่วยให้สามารถวิเคราะห์ด้วยตาเปล่าหรือสเปกโตรโฟโตเมตรีได้ง่าย

ในด้านฮิสโตโลยี o-Dianisidine dihydrochloride ใช้เป็นสารย้อมสีเพื่อระบุส่วนประกอบเซลล์เฉพาะ โดยเฉพาะในการศึกษาตัวอย่างเลือดและเนื้อเยื่อ ช่วยในการแสดงภาพกิจกรรมของเพอร์ออกซิเดส ซึ่งมีประโยชน์ในการวินิจฉัยโรคบางชนิด

นอกจากนี้ ยังใช้ในการสังเคราะห์สีย้อมและเม็ดสี โดยเฉพาะสีย้อมอะโซ ซึ่งนำไปใช้อย่างแพร่หลายในอุตสาหกรรมสิ่งทอและการพิมพ์ ความสามารถในการสร้างสารประกอบที่มีสีคงทนทำให้มีคุณค่าในการผลิตสีที่สดใสและยั่งยืน

ในการตรวจสอบสิ่งแวดล้อม สารเคมีนี้ใช้ในการตรวจจับปริมาณร่องรอยของสารออกซิแดนท์ เช่น ไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์ ในตัวอย่างน้ำและดิน ความไวต่อสปีชีส์ที่ทำปฏิกิริยาเฉพาะทำให้เป็นเครื่องมือที่มีประโยชน์ในการรับประกันความปลอดภัยทางสิ่งแวดล้อมและการปฏิบัติตามมาตรฐานกฎระเบียบ

ควรระมัดระวังในการใช้งานเนื่องจากอาจเป็นสารที่มีผลกระทบต่อสุขภาพ