4-Nitrophenyl phosphate disodium salt hexahydrate ใช้เป็นสารตั้งต้นในงานทดสอบเอนไซม์ โดยเฉพาะกิจกรรมของ alkaline phosphatase ในงานวิจัยทางชีวเคมี ช่วยในการตรวจจับและวัดปริมาณเอนไซม์ เมื่อเอนไซม์ phosphatase ทำปฏิกิริยากับสารนี้ จะเกิดการไฮโดรไลซ์และปลดปล่อย 4-nitrophenol ซึ่งเป็นสาร chromogenic ที่สร้างสีเหลืองและวัดได้ด้วยการดูดกลืนแสงที่ความยาวคลื่น 405 nm ทำให้ประเมินกิจกรรมเอนไซม์ได้อย่างแม่นยำ นอกจากนี้ ยังใช้ในชุดทดสอบวินิจฉัยทางการแพทย์เพื่อวัดระดับเอนไซม์ในตัวอย่างทางคลินิก ในชีววิทยาโมเลกุล ทำหน้าที่เป็นสาร chromogenic ที่ผลิตการเปลี่ยนสีที่ตรวจจับได้เมื่อถูกไฮโดรไลซ์โดยเอนไซม์ ช่วยในการมองเห็นและวิเคราะห์ นอกจากนี้ ยังนำไปใช้ในการตรวจสอบสิ่งแวดล้อมเพื่อประเมินกิจกรรม phosphatase ในตัวอย่างดินและน้ำ ให้ข้อมูลเชิงลึกเกี่ยวกับกิจกรรมของจุลินทรีย์และการหมุนเวียนสารอาหาร รวมถึงใช้ในงานวิจัยทางวิทยาศาสตร์เพื่อศึกษากลไกการทำงานของเอนไซม์และปฏิกิริยาเคมีที่เกี่ยวข้อง