สารประกอบนี้ถูกใช้อย่างแพร่หลายเป็นสารตั้งต้นในงานทดสอบทางชีวเคมีเพื่อวัดกิจกรรมของเอนไซม์ phosphatase เมื่อเอนไซม์ phosphatase ทำงาน จะเกิดการแยกกลุ่มฟอสเฟตออก ปล่อย 4-nitrophenol ซึ่งมีสีเหลืองและสามารถวัดปริมาณได้ง่ายโดยใช้สเปกโตรโฟโตเมตรที่ความยาวคลื่นประมาณ 405 nm ทำให้เป็นเครื่องมือที่มีคุณค่าในห้องปฏิบัติการวิจัยและวินิจฉัยสำหรับศึกษากลไกการทำงานของเอนไซม์ การคัดกรองสารยับยั้ง และการประเมินกิจกรรม phosphatase ในตัวอย่างชีวภาพต่างๆ ความเสถียรและความไวของมันช่วยเพิ่มประสิทธิภาพในงานคัดกรองความเร็วสูงและงานทดสอบแบบเชื่อมโยงเอนไซม์ นอกจากนี้ยังใช้ในงานวิจัยด้านชีววิทยาโมเลกุลและเภสัชวิทยาเพื่อพัฒนายาหรือสารออกฤทธิ์ที่เกี่ยวข้องกับเอนไซม์ phosphatase