ใช้อย่างแพร่หลายในงานทดสอบเอนไซม์ โดยเฉพาะสำหรับการวัดกิจกรรมของโปรตีเอสเซรีนแบบ trypsin-like สารนี้ทำหน้าที่เป็นซับสเตรตโครโมเจนิก ปล่อย 4-nitroaniline สีเหลืองเมื่อถูกเอนไซม์เป้าหมายตัด ซึ่งสามารถตรวจวัดได้ง่ายด้วยสเปกโตรโฟโตเมตรีที่ความยาวคลื่นประมาณ 380–410 นาโนเมตร ความจำเพาะสูงทำให้เหมาะสำหรับการศึกษากิเนติกและการคัดกรองสารยับยั้งในการวิจัยทางชีวเคมีและเภสัชกรรม ใช้บ่อยในงานควบคุมคุณภาพของการเตรียมเอนไซม์และในแพลตฟอร์มคัดกรองความเร็วสูง เนื่องจากสัญญาณที่เชื่อถือได้และความเสถียรภายใต้สภาวะทดสอบ