ใช้เป็นสารตั้งต้นในงานทดสอบเอนไซม์ โดยเฉพาะสำหรับตรวจจับกิจกรรมของเอสเทอเรสและไลเปส เมื่อถูกไฮโดรไลซ์โดยเอนไซม์เหล่านี้ จะปล่อย 2-ไนโตรฟีนอล ซึ่งมีสีเหลืองและสามารถวัดด้วยสเปกโตรโฟโตเมตรีที่ความยาวคลื่นประมาณ 400–420 nm การเปลี่ยนสีนี้ช่วยให้สามารถตรวจสอบกิจกรรมของเอนไซม์ได้ง่ายในห้องปฏิบัติการ นิยมใช้ในงานทดสอบวินิจฉัยและการวิจัยทางชีวเคมีเพื่อวัดปริมาณเอนไซม์หรือการยับยั้ง นอกจากนี้ยังใช้ในการคัดกรองจุลินทรีย์สำหรับการผลิตเอสเทอเรสในการศึกษาจุลชีววิทยา