ใช้เป็นสารตั้งต้นในปฏิกิริยาเอนไซม์ โดยเฉพาะอย่างยิ่งสำหรับตรวจจับและวัดปริมาณการทำงานของอัลคาไลน์ฟอสฟาเทส (Alkaline Phosphatase) เมื่อถูกเอนไซม์ทำการดีฟอสโฟรีเลต จะเกิดผลิตภัณฑ์ 4-ไนโตรฟีนอล ซึ่งมีสีเหลืองในสภาวะเบส ช่วยให้สามารถตรวจวัดด้วยสเปกโตรโฟโตเมตรีได้ง่ายที่ความยาวคลื่นประมาณ 405 นาโนเมตร ปฏิกิริยานี้ทำให้มีคุณค่าในด้านการวินิจฉัยทางคลินิก ห้องปฏิบัติการวิจัย และการตรวจวัดแบบเชื่อมโยงกับภูมิคุ้มกันด้วยเอนไซม์ (ELISAs) ความไวสูงและการเปลี่ยนสีที่ชัดเจนช่วยเพิ่มประสิทธิภาพในการตรวจจับแบบ colorimetric ระบบ มักรวมอยู่ในชุดตรวจวินิจฉัยและชุดทดสอบชีวเคมีเนื่องจากความเสถียรและประสิทธิภาพที่เชื่อถือได้