ใช้เป็นสารตั้งต้นในการศึกษาและวิเคราะห์กิจกรรมของเอนไซม์โปรตีเอส โดยเฉพาะเอนไซม์ที่มีบทบาทในการตัดพันธะเปปไทด์ในโปรตีน เช่น คายโมทริปซินและโปรตีเอสอื่นๆ สารนี้ทำหน้าที่เป็นซับสเตรตสังเคราะห์ที่เมื่อถูกตัดโดยโปรตีเอส จะปลดปล่อย 4-ไนโตรอะนิลีนออกมา ซึ่งสามารถวัดปริมาณได้ด้วยการดูดกลืนแสงที่ความยาวคลื่นประมาณ 405 นาโนเมตร ทำให้เหมาะสำหรับการวิเคราะห์เชิงปริมาณกิจกรรมของเอนไซม์ในระบบชีวเคมี การใช้งานนี้จึงพบได้บ่อยในงานวิจัยด้านชีววิทยาโมเลกุล ชีวเคมี และการพัฒนายาที่เกี่ยวข้องกับการยับยั้งโปรตีเอส