โฟลินิก แอซิด แคลเซียม ซอลท์ ไฮเดรต ถูกใช้อย่างแพร่หลายในการรักษาทางการแพทย์ โดยเฉพาะอย่างยิ่งเป็นยาแก้พิษสำหรับพิษเมโทเทรกเซต ซึ่งช่วยกู้คืนเซลล์ปกติจากผลกระทบอันตรายของเมโทเทรกเซต ยาเคมีบำบัด โดยให้เส้นทางทางเลือกสำหรับการสังเคราะห์ DNA

ในการรักษามะเร็ง มันมักถูกใช้ร่วมกับฟลูออโรยูราซิล (5-FU) เพื่อเพิ่มประสิทธิภาพของการเคมีบำบัดในการรักษามะเร็งลำไส้ใหญ่และลำไส้ตรง โดยทำงานผ่านการทำให้การจับตัวของ 5-FU กับเอนไซม์เป้าหมายมั่นคงขึ้น ส่งผลให้ยามีความสามารถในการยับยั้งการเจริญเติบโตของเซลล์มะเร็งดีขึ้น

สารประกอบนี้ยังถูกนำมาใช้ในการรักษาภาวะขาดโฟเลต โดยทำหน้าที่เป็นรูปแบบที่กระตือรือร้นทางชีวภาพของกรดโฟลิก สนับสนุนการผลิตเซลล์เม็ดเลือดแดงและป้องกันภาวะโลหิตจาน นอกจากนี้ ยังใช้ในการบำบัดแบบ leucovorin rescue เพื่อลดผลข้างเคียงจากเมโทเทรกเซตขนาดสูงในผู้ป่วยมะเร็ง

ในการดูแลก่อนคลอด มันบางครั้งถูกให้เพื่อลดความเสี่ยงของความบกพร่องของหลอดประสาทในทารกที่กำลังพัฒนา โดยเฉพาะในผู้หญิงที่มีประวัติดังกล่าวหรือผู้ที่ใช้ยาบางชนิดที่รบกวนการเผาผลาญโฟเลต บทบาทของมันในการสนับสนุนการซ่อมแซมและการเจริญเติบโตของเซลล์ทำให้เป็นส่วนประกอบที่มีคุณค่ามากในการประยุกต์ใช้บำบัดต่างๆ