ใช้เป็นสารตั้งต้นหลักในงานทดสอบเอนไซม์ โดยเฉพาะสำหรับการวัดกิจกรรมของไพรูเวต ไคน์ในงานวิจัยทางชีวเคมี มีบทบาทสำคัญในกระบวนการไกลโคไลซิสและการศึกษาเมแทบอลิซึมพลังงาน นอกจากนี้ยังใช้ในการเตรียมอนุพันธ์ของฟอสโฟอีโนลไพรูเวตสำหรับการประยุกต์ใช้ในชีววิทยาสังเคราะห์ ทำหน้าที่เป็นผู้บริจาคฟอสเฟตในการสังเคราะห์นิวคลีโอไทด์และสารประกอบฟอสโฟรีเลตอื่นๆ และใช้กันทั่วไปในชุดตรวจวินิจฉัยสำหรับการวิเคราะห์ทางคลินิกของความผิดปกติทางเมแทบอลิซึม