4-Nitro-1H-benzo[d]imidazol-2(3H)-one นิยมใช้ในงานวิจัยทางเคมีและเภสัชวิทยา เพื่อศึกษาปฏิกิริยาและกลไกทางชีวเคมี โดยเฉพาะอย่างยิ่งในการพัฒนายาและสารออกฤทธิ์ทางชีวภาพ นอกจากนี้ ยังอาจใช้เป็นสารตั้งต้นหรือสารกลางในการสังเคราะห์สารประกอบอื่นๆ ที่มีความซับซ้อนมากขึ้น โดยเฉพาะในกลุ่มสารประกอบเบนโซอิมิดาโซล ซึ่งมีศักยภาพในการออกฤทธิ์ทางยาหรือเป็นส่วนประกอบของวัสดุที่มีคุณสมบัติพิเศษ