โอฟล็อกซาซินถูกใช้เป็นยาปฏิชีวนะที่มีประสิทธิภาพในการรักษาการติดเชื้อแบคทีเรียหลายชนิด เช่น การติดเชื้อในระบบทางเดินปัสสาวะ การติดเชื้อในระบบทางเดินหายใจ การติดเชื้อที่ผิวหนังและเนื้อเยื่ออ่อน รวมถึงการติดเชื้อในช่องท้องและอวัยวะสืบพันธุ์ นอกจากนี้ยังใช้ในการรักษาการติดเชื้อที่ดวงตาในรูปแบบยาหยอดตา และบางครั้งอาจใช้ในการป้องกันการติดเชื้อหลังการผ่าตัด โอฟล็อกซาซินทำงานโดยการยับยั้งการสังเคราะห์ DNA ของแบคทีเรีย ทำให้แบคทีเรียไม่สามารถเพิ่มจำนวนและแพร่กระจายได้