20a-Hydroxycholesterol ถูกนำมาใช้ในการศึกษาวิจัยทางชีววิทยาและชีวเคมี โดยเฉพาะอย่างยิ่งในกระบวนการเมตาบอลิซึมของคอเลสเตอรอลและการสังเคราะห์ฮอร์โมนสเตียรอยด์ ในห้องปฏิบัติการ มันถูกใช้เป็นสารตั้งต้นหรือตัวกลางในการศึกษาปฏิกิริยาของเอนไซม์ที่เกี่ยวข้องกับการเปลี่ยนแปลงของคอเลสเตอรอล เช่น เอนไซม์ CYP450 นอกจากนี้ ยังมีการศึกษาเกี่ยวกับบทบาทของมันในการควบคุมการแสดงออกของยีนและการสื่อสารระหว่างเซลล์ ซึ่งอาจมีผลต่อการพัฒนายาหรือการรักษาโรคที่เกี่ยวข้องกับคอเลสเตอรอลและฮอร์โมน